2026-10-13T03:39:35Z https://www.scidb.cn/oai

10.57760/sciencedb.j00217.08477 2025-07-04T16:28:21Z

2025-07-04 The establishment of hIL-15、hIL-18 and hIL-21 gene-modified K562 feeder cells for expanding NK cells and related mechanisms doi:10.57760/sciencedb.j00217.08477 en 目的 为了获得满足临床应用的高质量 NK 细胞，本研究探索了一种以 hIL-15、hIL-18 和 hIL-21 基因修饰的 K562 细胞作为饲养细胞扩增 NK 细胞的有效方案，并阐明了潜在的分子机制。方法 采用慢病毒转染分别构建 HIL-15 、 hIL-18 和 hIL-21 基因修饰的 K562 细胞。进行 RT-qPCR 和 ELISA 验证 hIL-15 、 hIL-18 和 hIL-21 的过表达。使用台盼蓝排除试验评估这些饲养细胞扩增 NK 细胞的能力，而 CCK8 测定评估扩增的 NK 细胞对癌细胞的细胞毒性。流式细胞术检测 NK 细胞中细胞毒性相关分子的表达。使用 GEO 数据库分析 PBMC NK 细胞中 IL-15 、 IL-18 和 IL-21 诱导的差异表达基因 （DEGs），然后进行 GO 和 KEGG 分析。采用 RT-qPCR、流式细胞术和 Western blotting 检测验证这些 DEGs，分别构建分泌 hIL-15 、 hIL-18 和 hIL-21 的 K562 细胞。IL-15/18/21-K562 细胞的组合最适合 NK 细胞扩增并增强 NK 细胞的细胞溶解活性。机制研究显示，IL-15/18/21-K562 细胞的组合增强了 XBP1 蛋白在未折叠蛋白反应中的表达，促进了 NK 细胞的细胞周期进程和 NK 细胞产生细胞毒性相关分子。结论 IL-15/18/21-K562 饲养层细胞的组合可有效扩增 NK 细胞，增强 NK 细胞介导的细胞对肿瘤细胞的溶血，本研究为获得满足临床治疗需要的 NK 细胞提供了一种有效的制备策略。 Tumor therapy; NK cells; Feeding cells; Cytokine null.null null.null RESTRICTED dataset Science Data Bank